Caracterización microbiológica y molecular de Staphylococcus aureus en productos cárnicos comercializados en Cartagena Colombia / Microbiology and Molecular Characterization of Staphylococcus aureus in meat products marketed in Cartagena, Colombia

ResumenStaphylococcus aureus en la actualidad no solamente hace parte de los microorganismos nosocomiales sino también de enfermedades transmisibles por alimentos-ETAs.Objetivo:Cuantificar y caracterizar por metodología microbiológica convencional y análisis molecular Staphylococcus aureus presente en carne de res y cerdo.Método:Fueron utilizadas 160 muestras de carne molida de res y chuleta de cerdo, en 40 expendios de tres localidades de la ciudad de Cartagena: 1. Histórica y del caribe Norte (LH); 2. Industrial de la Bahía (LI); 3. De la Virgen y Turística (LV). Para la identificación microbiológica fue utilizada la técnica de recuento en placa y la técnica de Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR).Resultados:La metodología microbiológica convencional identificó Staphylococcus aureus en el 100 % de las muestras. La técnica PCR confirmó la presencia de Staphylococcus aureus en el 88 %. El 72 % de los expendios presento recuentos > 100 UFC/g, 27 % presentaron recuentos < 100 UFC/g. La localidad industrial de la Bahía presento (48,2 %), seguido de la localidad Histórica y del Caribe Norte con 34,4 %.Discusión:El 32,5 % de los expendios analizados comercializan carne molida y chuleta de cerdo no apta para el consumo humano, por presentar recuentos que sobrepasan los parámetros de referencia para Staphylococcus aureus en carnes crudas picadas y molidas (100 - 1000 UFC/g). Fue determinada la presencia del gen MecA que codifica las cepas de Staphylococcus aureus resistente a Meticilina (SARM) en dos muestras que por metodología molecular no corresponde a Staphylococcus aureus.

AbstractStaphylococcus aureus at present not only is part of nosocomial microorganisms but also of food - borne diseases.Objetive:quantify and characterize by conventional microbiological and molecular analysis methodology to Staphylococcus in beef and pork meat.Method:They were used 160 samples of ground beef and pork chop, 40 outlets in three locations in the city of Cartagena: 1. Historic North and Caribbean (LH) 2. Bay Industrial (LI) 3. Virgin and Tourism (LV). For microbiological identification was used the plate count technique and the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR).Results:The conventional microbiological methods Staphylococcus aureus was identified in 100 % of samples, while the PCR confirmed the presence of Staphylococcus aureus in 88 %. In 72 % of outlets were found counts > 100 CFU/g, 27 % had counts < 100 CFU/g. The highest percentage was found in the industrial town of Bay (48,2 %), followed by the Historical town and North Caribbean with 34,4 %. 32,5 % of analyzed are marketing outlets and ground pork chop unfit for human consumption meat, to present counts that exceed benchmarks for Staphylococcus aureus in raw meat chopped and ground (100-1000 CFU/g). It was determined the presence of the MecA gene encoding strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in two samples by molecular methods is not for Staphylococcus aureus.

Portación nasal de Staphylococcus aureus en individuos de la comunidad: factores epidemiológicos / Nasal carriage of Staphylococcus aureus in community individuals: epidemiological factors / Carreamento nasal de Staphylococcus aureus em indivíduos da comunidade: fatores epidemiológicos

La portación nasal de Staphylococcus aureus (SAU) en individuos sanos confirma su diseminación, constituye una fuente potencial de infección y se la relaciona con patologías atópicas. El objetivo del trabajo fue determinar la prevalencia de colonización nasal de SAU en individuos de la comunidad, sus respectivos patrones de resistencia antimicrobiana (PRA) y su asociación con factores epidemiológicos. Se realizó un estudio en 150 hisopados nasales. Se identificaron los aislados de SAU por métodos convencionales, y se evaluó su sensibilidad antimicrobiana por el método de difusión con discos de Kirby-Bauer y en cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (SAMR) se confirmó la presencia del gen mec A y se investigó el gen lpv codificante de la toxina de Panton y Valentine (LPV) por PCR. Se analizó su asociación con factores epidemiológicos (lesiones, rinitis, etc.) con el programa SPSS. Se obtuvieron 119 aislamientos de SAU (79%) con 12 PRA. Las PCR de las cepas SAMR fueron positivas para el gen mec A y negativas para el gen lpv. Estadísticamente se detectó asociación de colonización nasal con sexo masculino y rinitis. Se concluye que la prevalencia de portación nasal de SAU en la comunidad fue elevada y mayor en varones. Los aislamientos multirresistentes y SAMR- LPV (-) sugieren relación hospitalaria y su diseminación a la comunidad. Es importante el hallazgo de la asociación epidemiológica con rinitis, la cual confirma vinculación con patologías atópicas.

Nasal carriage of Staphylococcus aureus (SAU) in healthy individuals confirms its spreading, constitutes a potential infection source and is related to atopic pathologies. The objetive was to determine the prevalence of SAU nasal carriage in community individuals, its antimicrobial resistance patterns (ARP) and its association with epidemiological factors. A total of 150 nasal swabs were studied, where SAU isolates were identified by conventional methods and their antimicrobial sensitivity was evaluated by disk diffusion Kirby Bauer test. In addition, the presence of mec A gene was confirmed and the lpv gene coding for Panton-Valentine toxin (PVL) was investigated by PCR in methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains. Its association with epidemiological factors (injuries, rhinitis, etc) was analyzed with SPSS program. One hundred and nineteen (79%) SAU isolates with 12 ARP were obtained. PCR assays of MRSA strains were positive for the mec A gene and negative for the lpv gene. Association between nasal colonization and both male sex and rhinitis was detected statistically. It can be concluded that high prevalence of SAU nasal carriage was found in the community, mainly in males. Multiresistant isolates and lpv (-) MRSA suggest a hospital-acquired infection with subsequent dissemination to the community. The epidemiological association with rhinitis, which confirms the link with atopic pathologies, deserves to be highlighted.

O carreamento nasal de Staphylococcus aureus (SAU) em individuos saudáveis confirma sua disseminagao, constitui uma fonte potencial de infecgao e é relacionada com patologias atópicas. O objetivo do trabalho foi determinar a prevalencia de colonizagao nasal de SAU em individuos da comunidade, seus respectivos padróes de resistencia antimicrobiana (PRA) e sua associagao com fatores epidemiológicos. Foi realizado um estudo em 150 esfregagos nasais. Identificaramse os isolados de SA U por métodos convencionais, e foi avaliada sua sensibilidade antimicrobiana pelo método de difusao com discos de Kirby-Bauer e em cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (SAMR) foi confirmada a presenga do gene mec A e se investigou o gene lpv codificante da toxina de Panton - Valentine (LPV) por PCR. Foi analisada sua associagao com fatores epidemiológicos (lesóes, rinite, etc.) com o programa SPSS. Obtiveramse 119 isolamentos de SAU (79%) com 12 PRA. As PCR das cepas SAMR foram positivas para o gene mec A e negativas para o gene lpv. Estatisticamente se detectou associagao de colonizagao nasal com sexo masculino e rinite. Concluise que a prevalencia de carreamento nasal de SAU na comunidade foi elevada e maior em homens. Os isolamentos multirresistentes e SAMR- LPV (-) sugerem relagao hospitalar e sua disseminagao para a comunidade. É importante o achado da associagao epidemiológica com rinite, a qual confirma vinculagao com patologias atópicas.

Presence of enterotoxigenic Staphylococcus aureus in bulk tank milk from Argentine dairy farms / Presencia de Staphylococcus aureus enterotoxigénico en leche de tanque de frío de tambos de Argentina

Staphylococcus aureus is the most prevalent bovine mastitis pathogen in Argentina. The ability of this organism to produce enterotoxins is linked to staphylococcal food poisoning. Staphylococcal enterotoxins are low molecular weight proteins, highly resistant to heat and proteolytic enzyme activity. The aim of this study was to determine the ability to produce enterotoxins and types of enterotoxins A through E produced among 94 S. aureus isolated from bulk tank milk in Argentina by enzyme-linked immunosorbent assay. Eleven isolates (11.7 %) produced enterotoxins. Seven of them (7.4 %) produced enterotoxin C, two (2.1 %) enterotoxin D, one (1.1 %) enterotoxin B and one (1.1 %) enterotoxins C-D-E. None of the isolates produced enterotoxins A or E alone. Since presence of staphylococcal enterotoxins constitute a potential risk to public health, these findings underscore the need to control S. aureus bovine mastitis and to limit bacterial multiplication in bulk tank milk.

Staphylococcus aureus es el patógeno causante de mastitis más prevalente en Argentina. Las enterotoxinas producidas por este organismo constituyen una de las causas más importantes de intoxicación alimentaria en seres humanos. Las enterotoxinas estafilocócicas son proteínas de bajo peso molecular, termoestables y resistentes a enzimas proteolíticas. El objetivo del presente trabajo fue determinar por enzimoinmunoensayo la presencia de enterotoxinas A-E y establecer su tipo en 94 aislamientos de Staphylococcus aureus obtenidos de leche de tanque de frío de tambos de Argentina. Se identificaron 11 % aislamientos enterotoxigénicos (11,7 %); siete (7,4 %) produjeron enterotoxina C, dos produjeron enterotoxina D (2,1 %), uno produjo enterotoxina B (1,1 %) y uno produjo enterotoxinas C-D-E (1,1 %). No se detectaron aislamientos que produjeran enterotoxinas A o E solamente. Estos hallazgos indican la necesidad de implementar un eficaz control de la mastitis bovina para disminuir la presencia de S. aureus en leche de tanque y evitar riesgos potenciales para la salud pública.

Detección fenotípica y molecular de resistencia a meticilina en S. aureus / Phenotypic and molecular detection of methicillin resistance in S. aureus

La detección de resistencia a meticilina es complicada debido a la heterogeneidad de su expresión fenotípica; dificultando su detección en el laboratorio, lo que ha conducido al desarrollo de varias técnicas para incrementar su expresión in vitro. A fin de evaluar cuatro técnicas para la detección de resistencia a meticilina: método de difusión del disco con oxacilina (OX, 1 ug) y cefoxitin (FOX, 30 ug); screening test, concentración inhibitoria mínima (CIM) y detección de PBP2a, utilizando la presencia del gen mecA como método de referencia, se procesaron 286 cepas de S. aureus. Se determinó la sensibilidad (SEN), especificidad (ESP), valor predictivo positivo (VPP), valor predictivo negativo (VPN) y eficiencia (EFC) de cada uno de los métodos. Se obtuvo un total de 50 cepas resistentes a oxacilina, PBP2a positivos (mecA positivos). La sensibilidad del disco de OX fue de 99.14 por ciento y la de FOX fue de 100 por ciento. La SEN, VPP, VPN y EFC de los otros métodos fue de 100 por ciento. Todas, a excepción del método de difusión del disco de OX (ESP de 99.14), resultaron 100 por ciento específicos.

Detecting methicillin resistance is complicated due to the heterogeneity of its phenotypic expression, making its detection difficult in the laboratory; this has led to the development of several techniques to increase its expression in vitro. Four techniques for detecting methicillin resistance were evaluated: the disk diffusion method with oxacillin (OX, 1 ug) and cephoxitin (FOX, 30 ug); the screening test, minimum inhibitory concentration (MIC) and detection of PBP2a, using the presence of mecA gen as a reference method; 286 strains of S. aureus, were processed. The sensibility (SEN), specificity (SPE), positive predictive value (PPV), negative predictive value (NPV) and efficiency (EFC) of each method were determined. A total of 50 oxacillin resistant, PBP2a positive (mecA positive) strains were obtained. Sensibility of the OX disk was 99.14 percent; and of the FOX disk was 100 percent. The SEN, PPV, NVP and EFC of the other methods were 100 percent. All the tests, except the OX disk diffusion method (99.14 percent of ESP), were 100 percent specific.

Ausencia de actividad antimicrobiana de un extracto acuoso liofilizado de Aloe vera (Sabila) / Absence of antimicrobial activity of lyophilized aqueous extract of Aloe vera (sabila)

Se estudio la actividad antimicrobiana de dos concentraciones (10 y 50 mg/mL) de un extracto acuoso liofilizado de hojas de Aloe vera (sabila), mediante el sistema de ensayo de difusion en agar, con una bateri aminima de cepas de microorganismos compuesta por cuatro bacterias (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilils, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa) y una levadura (Candida albicans). Los resultados indican que solo frente al Staphylococcus aureus se obteine una ligera actividad inhibitoria, al compararla con la que produce el control positivo (estreptomicina). Para el resto de los microorganismos estudiados la respuesta es negativa. Estos resultados permiten desestimar el uso del extracto acuoso liofilizado de Aloe vera como antimicrobiano, en tanto que sugiere explorar este efecto con otro tipo de extracto con el objetivo de avalar o no la utilizacion de esta planta como antimicrobiano

Actividad antimicrobiana del Schinus terebentifolius Raddi (copal) / Antimicrobial activity of Schinus terebentifolius Raddi (copal)

Se estudio la actividad antimicrobiana de diferentes concentraciones de un extracto fluido (etanol al 30 porciento) de hojas de Schinus terebenthifolius Raddi (copal) con una bateria minima de cepas de microorganismos que incluye Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis, como grampositivo, escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa, como gramnegativo y la levadura, Candida albicans, mediante el metdo de difusion en agar. Los resultados obtenidos indican que en la menor concentracion utilizada, del 10 porciento del extracto fluido, no se aprecia inhibicion de ninguno de los microorganismos evaluados, mientras que en las concentraciones del 50 y el 100 porciento del extracto fluido hay respuesta de inhibicion frente a las bacterias grampositiva y gramnegativa, pero no asi con la levadura. Estos resultados contribuyen a ratificar experimentalmente el uso tradicional que se hace de esta planta como antimicrobiano, ademas sugiere la elaboracion de formas farmaceuticas que permitan ampliar con mayor eficiencia su utilizacion para este objetivo

effect of clindamycin on the adherence of staphylococcus aureus to hydrocarbons and fibrin clots

The effect of clindamycin on the adherence of Staphylococcus aureus, replicating and non-replicating, to hydrocarbons and fibrin clots was studied. Staph. aureus adhered well in both model systems. Clindamycin inhibited adherence in both model systems when it was included in the assay media. Staph. aureus grown at 1/2 MIC of clindamycin also showed decreased adherence in both systems

Método para cuantificar actividad proteolítica sobre sustratos insolubles coloreados / Method for quantitative proteolytic activity about stained substrates insoluble

Se cuantificó la actividad proteolítica de Staphylococcus aureus aislados de infecciones del hombre, aplicando una modificación de la técnica efectuada por otros autores con Pseudomonas aeruginosa. Además del polvo de piel coloreado con Azul Brillante de Remazol utilizado con esta bacteria, se prepararon otros sustratos insolubles, tales como elastina-Rojo Congo, colágeno-Rojo Congo y polvo de ubre-Rojo Congo. Fue posible comprobar mayor actividad proteolítica sobre colágeno que sobre elastina, mientras que con los extractos o polvos tisulares se evidenció más proteólisis con polvo de ubre de vaca (PUH) que con polvo de piel (PPA). Cabe destacar que las cepas procedían de infecciones humanas, incluyendo afecciones no epidérmicas y una de colección ATCC. El método desarrollado constituyó una ventaja con respecto a las técnicas clásicas de bacteriología que detectan cualitativamente la actividad proteolítica